细胞冻存是生物医疗领域中保存细胞的重要方法，通过低温减缓细胞的生命活动。这项技术不仅允许细胞长时间保存，还能在需要时迅速复苏，用于各种实验研究。19世纪末，科学家们开始关注低温对生物组织的影响，早期实验发现，单纯的冷冻往往会导致细胞内形成冰晶并引起渗透压失衡，最终导致细胞死亡。

1937年，Luyet和Hodapp提出了“冰晶损伤”理论，这为后续的冷冻保护研究奠定了基础。1949年，英国科学家在研究精子冷冻时意外发现，甘油能够显著提高冷冻后精子的存活率。作为一种渗透性冷冻保护剂（CPA），甘油可以渗透细胞内部，降低冰点并减少冰晶的形成，从而平衡细胞内外的渗透压，防止细胞在冻存中因脱水而破裂。

1959年，研究者发现二甲基亚砜（DMSO）也具备出色的冷冻保护效果，尤其是对于哺乳动物细胞。与甘油相比，DMSO更容易穿透细胞膜，且毒性较低，迅速成为细胞冻存的标准保护剂之一。1963年，Peter Mazur提出了冷冻损伤的“两因素假说”，指出快速冷冻时细胞内的冰晶会破坏细胞膜，而慢速冷冻则会使细胞外形成冰晶，导致细胞脱水和溶质浓度升高，从而产生化学毒性。这一理论为程序化慢冻法提供了科学依据。

在细胞冻存的实践中，大部分细胞遵循“慢速冻存”的原则，通过程序降温设备精确控制降温速率（一般为1°C/min），使细胞逐步脱水，避免细胞内结冰，从而显著提高冻存细胞的存活率。研究数据显示，5%-10%的DMSO最适合细胞冻存，具体的比例可根据细胞类型进行调整。对于对DMSO敏感的细胞，需降低其比例。根据经验，8%DMSO适用于大多数细胞系。同时，为了适应不同细胞的培养难度，血清的比例也应进行调整，培养较困难的细胞则需增加血清量，脆弱的细胞可以与血清和DMSO一起冻存，而不添加培养基。

常用的冻存液配方有92%FBS加8%DMSO（适合初学者）或92%完全培养基加8%DMSO（适合熟练者）。此外，尚恩生物提供的特级胎牛血清呈现浅黄色、澄清且无溶血，经检测确认无菌、无支原体、无噬菌体及相关牛源病毒，同时低内毒素（＜3EU/mL），不含外源激素、生长因子及抗生素，适用于肿瘤细胞、原代细胞及大部分干细胞的培养。

货号：SNS-002 的尚恩非程序性细胞冻存液（无血清）是一种不含血清且不需经过程序降温步骤的冻存液。其优点在于能够在重悬细胞后，直接放入超低温冰箱，省去了逐步降温的复杂过程，极大地方便了细胞冻存操作，减少了血清对细胞及实验的影响。货号：SNR-006。

无论使用何种冻存液，建议在正式冻存前进行冻检：即冻存24小时后复苏一支细胞，以确认细胞状态正常，之后再进行大规模冻存。在冻检成功前，需至少保留一瓶细胞培养，以防复苏失败导致细胞灭绝。

公司简介：ag尊龙凯时，武汉尚恩生物技术有限公司位于武汉东湖高新区光谷生物城，专注于细胞及其相关产品的研发、生产和服务。我们的设施包括标准化GMP实验室和动物房，已通过GB/T19001-2016/ISO9001:2015质量管理体系认证，并获得多个高新技术企业荣誉。公司主要研发和生产细胞系、原代细胞、胎牛血清、基础培养基、完全培养基以及辅助试剂等一系列产品，提供细胞及相关配套产品的一站式采购服务。

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